背景介紹
慢病毒(Lentivirus)是逆轉(zhuǎn)錄病毒科下的一個屬,其基因結(jié)構(gòu)和其他逆轉(zhuǎn)錄病毒類似。包含RNA和蛋白,遺傳信息儲存在RNA中,衣殼糖蛋白與細胞膜上特異受體結(jié)合而進入易感靶細胞。其RNA進入靶細胞,經(jīng)過反轉(zhuǎn)錄,整合到基因組,從而高水平的表達效應(yīng)分子。點擊了解產(chǎn)品
慢病毒載體基因遞送和表達的特點
一、感染譜廣
可有效感染腫瘤細胞、神經(jīng)元、心肌細胞、內(nèi)皮細胞、干細胞等多種類型細胞
二、穩(wěn)定表達
通過將外源基因整合到宿主細胞基因組上,可實現(xiàn)目的基因長期穩(wěn)定表達,不隨細胞分裂傳代而丟失
三、安全性高
未發(fā)現(xiàn)致病性,已被用于CAR-T治療作用于人體
四、免疫原性低
體內(nèi)注射不會引起明顯的免疫反應(yīng),適用于動物實驗
五、包裝容量有限
插入的外源基因序列需在4kb以下
六、包裝滴度較低
相比腺病毒與腺相關(guān)病毒,慢病毒包裝滴度稍低
慢病毒包裝
示意圖(圖片來源于網(wǎng)絡(luò))
慢病毒包裝流程
慢病毒包裝/濃縮試劑盒
部分客戶引文
Duan Y, Li Q, Wu J, et al. A detrimental role of endothelial S1PR2 in cardiac ischemia-reperfusion injury via modulating mitochondrial dysfunction, NLRP3 inflammasome activation, and pyroptosis[J]. Redox Biology, 2024: 103244. |
Lin P, Chen W, Long Z, et al. RBBP6 maintains glioblastoma stem cells through CPSF3-dependent alternative polyadenylation[J]. Cell Discovery, 2024, 10(1): 32. |
Shan L, Liao X, Yang X, et al. Naked cuticle homolog 2 controls the differentiation of osteoblasts and osteoclasts and ameliorates bone loss in ovariectomized mice[J]. Genes & Diseases, 2024: 101209. |
Liu L, Liu Z, Liu Q, et al. LncRNA INHEG promotes glioma stem cell maintenance and tumorigenicity through regulating rRNA 2’-O-methylation[J]. Nature Communications, 2023, 14(1): 7526. |
Zhang X, Guo H, Chen J, et al. Highly proliferative and hypodifferentiated CAR-T cells targeting B7–H3 enhance antitumor activity against ovarian and triple-negative breast cancers[J]. Cancer Letters, 2023, 572: 216355. |
Zhang C, Li Q, Xu Q, et al. Pulmonary interleukin 1 beta/serum amyloid A3 axis promotes lung metastasis of hepatocellular carcinoma by facilitating the pre-metastatic niche formation[J]. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2023, 42(1): 166. |
常見問題解答
Q | 慢病毒顆粒濃縮后沒看到白色沉淀,怎么回事? |
A | 如果看不到明顯的白色沉淀,就在沉淀可能形成的區(qū)域用移液器小心吹打;白色沉淀的多少并不代表病毒量的多少。白色沉淀中除病毒顆粒外,還有血清蛋白和少量的細胞碎片和 基因組 DNA 等。二者在使用效果上無明顯差異,均溶于水,但熒光素鈉鹽溶解度(100mg/mL)要高于熒光素鉀鹽(60mg/mL)。在體內(nèi)實驗研究中,研究者更傾向于選擇熒光素鉀鹽。 |
Q | 按照慢病毒包裝試劑盒操作進行到收集病毒上清液這一步,該如何保存? |
A | 如果3天內(nèi)進行濃縮,可以將慢病毒懸液存儲在4°C。通常不建議超過3天,因為病毒的活性可能會逐漸降低;長期儲存的話,建議將慢病毒懸液分裝到無菌的冷凍管中,并存儲在-80°C的超低溫冰箱中。 |
Q | 病毒上清液與濃縮液混合后,孵育時間長短有影響嗎? |
A | 4℃放置的時間越長(如放置過夜),病毒的得率可能會更高;一般 4℃條件下病毒顆粒可以在濃縮液里穩(wěn)定保存幾天。 |
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