瞬時轉(zhuǎn)染的表達,外源基因?qū)胝匣蚪M的幾率非常低,絕大部分以游離形式存在,且隨著細胞傳代質(zhì)粒會不斷發(fā)生丟失,導致最后拷貝數(shù)被稀釋,無法達到持續(xù)表達外源基因的目的。一般用轉(zhuǎn)染試劑進行質(zhì)粒轉(zhuǎn)染,多為瞬時轉(zhuǎn)染。
將外源DNA克隆到帶有某種抗性的慢病毒載體上并進行病毒包裝,在慢病毒成功感染細胞后,慢病毒基因組會整合到宿主細胞的染色體中,用載體中所含的抗性標志進行篩選,成功感染的細胞可以在培養(yǎng)基中存活,而未感染上慢病毒的細胞則無法存活。因此在抗性篩選壓力下,可成功篩選來得到可穩(wěn)定表達目的蛋白,或者穩(wěn)定表達沉默特定基因的細胞株。
吉滿生物憑借多年的細胞培養(yǎng)及病毒包裝經(jīng)驗,推出細胞系構(gòu)建服務(wù),將攜帶外源基因的慢病毒感染到目的細胞中,通過篩選可獲得穩(wěn)定表達目的基因的細胞系,可用于基因功能研究。
吉滿生物細胞系構(gòu)建平臺