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熒光素酶報告基因質(zhì)粒構(gòu)建
簡介

根據(jù)客戶的實驗需求及待研究的目的基因,將特定的片段構(gòu)建到相應的報告基因載體上,用于基因表達調(diào)控作用,信號通路,SNP作用等相關研究。

吉滿可提供UTR報告基因質(zhì)粒,啟動子熒光素酶報告基因質(zhì)粒,SNP等其他報告基因。

特點

報告基因(reporter gene)是一種編碼可易于鑒定的蛋白質(zhì)或酶的基因,其與目的基因融合后的表達產(chǎn)物可用來標定目的基因的表達調(diào)控,廣泛應用于基因調(diào)控、RNA互作等研究領域。


作為報告基因,在遺傳選擇和篩選檢測方面必須具有以下幾個條件:

(1)已被克隆或全序列已被測定;

(2)表達產(chǎn)物在受體細胞中不存在,在被轉(zhuǎn)染細胞中無相似的內(nèi)源性表達產(chǎn)物;

(3)其表達產(chǎn)物容易被檢測到。


報告基因質(zhì)粒是整合有報告基因的重組質(zhì)粒。根據(jù)不同的研究方向需要構(gòu)建的基因序列及使用載體不同。其構(gòu)建方式主要參考待研究序列在基因上的位置。常用的啟動子報告基因載體有pGL3-basic載體。載體含Luciferase熒光素酶報告基因,無啟動子,用于研究目的啟動子的功能,在Luciferase上游包含一個多克隆位點,用于插入啟動子序列,若Luciferase熒光素酶活性上升,說明該段啟動子受到轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控。

常用的3’UTR報告基因載體為PGL3-CMV-LUC-MCS。該載體包含一個CMV啟動子控制下的luciferase報告基因。在luciferase的3'UTR區(qū)域包含一個多克隆位點,用于插入預測miRNA的結(jié)合靶序列或其他核苷酸序列。若熒光素酶活性下降,說明該段插入序列受到miRNA調(diào)節(jié),這模仿了miRNA靶序列的作用方式。

服務流程
優(yōu)勢

(1)吉滿生物具有專業(yè)的技術研究團隊和豐富的分子克隆經(jīng)驗;

(2)吉滿生物目前已有多種報告基因載體可選,應用于各種報告基因研究系統(tǒng);

(3)可根據(jù)客戶需求構(gòu)建不同的目的載體。

案例展示
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熒光素酶報告基因質(zhì)粒構(gòu)建
簡介

根據(jù)客戶的實驗需求及待研究的目的基因,將特定的片段構(gòu)建到相應的報告基因載體上,用于基因表達調(diào)控作用,信號通路,SNP作用等相關研究。

吉滿可提供UTR報告基因質(zhì)粒,啟動子熒光素酶報告基因質(zhì)粒,SNP等其他報告基因。

特點

報告基因(reporter gene)是一種編碼可易于鑒定的蛋白質(zhì)或酶的基因,其與目的基因融合后的表達產(chǎn)物可用來標定目的基因的表達調(diào)控,廣泛應用于基因調(diào)控、RNA互作等研究領域。


作為報告基因,在遺傳選擇和篩選檢測方面必須具有以下幾個條件:

(1)已被克隆或全序列已被測定;

(2)表達產(chǎn)物在受體細胞中不存在,在被轉(zhuǎn)染細胞中無相似的內(nèi)源性表達產(chǎn)物;

(3)其表達產(chǎn)物容易被檢測到。


報告基因質(zhì)粒是整合有報告基因的重組質(zhì)粒。根據(jù)不同的研究方向需要構(gòu)建的基因序列及使用載體不同。其構(gòu)建方式主要參考待研究序列在基因上的位置。常用的啟動子報告基因載體有pGL3-basic載體。載體含Luciferase熒光素酶報告基因,無啟動子,用于研究目的啟動子的功能,在Luciferase上游包含一個多克隆位點,用于插入啟動子序列,若Luciferase熒光素酶活性上升,說明該段啟動子受到轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控。

常用的3’UTR報告基因載體為PGL3-CMV-LUC-MCS。該載體包含一個CMV啟動子控制下的luciferase報告基因。在luciferase的3'UTR區(qū)域包含一個多克隆位點,用于插入預測miRNA的結(jié)合靶序列或其他核苷酸序列。若熒光素酶活性下降,說明該段插入序列受到miRNA調(diào)節(jié),這模仿了miRNA靶序列的作用方式。

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(1)吉滿生物具有專業(yè)的技術研究團隊和豐富的分子克隆經(jīng)驗;

(2)吉滿生物目前已有多種報告基因載體可選,應用于各種報告基因研究系統(tǒng);

(3)可根據(jù)客戶需求構(gòu)建不同的目的載體。

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