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轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控/promoter活性研究
簡(jiǎn)介

轉(zhuǎn)錄因子是一類(lèi)參與基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控的重要調(diào)節(jié)因子。不同轉(zhuǎn)錄因子的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域識(shí)別不同基因啟動(dòng)子區(qū)特定的堿基序列,行使抑制或激活該基因轉(zhuǎn)錄的功能。將目的基因啟動(dòng)子區(qū)域(通常取轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)TSS上游-2000bp)、或針對(duì)結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行突變、或分段截?cái)嘈蛄校瑯?gòu)建到報(bào)告基因載體luciferase的上游,共轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)錄因子過(guò)表達(dá)質(zhì)粒,通過(guò)熒光素酶活反映轉(zhuǎn)錄因子對(duì)啟動(dòng)子活性的調(diào)控作用。

啟動(dòng)子是基因的一個(gè)組成部分,作為基因表達(dá)的“開(kāi)關(guān)”,控制基因表達(dá)的起始時(shí)間和表達(dá)的程度。啟動(dòng)子本身并不控制基因活動(dòng),而是通過(guò)與稱(chēng)為轉(zhuǎn)錄因子的這種具有特殊結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)結(jié)合而控制基因活動(dòng)的。也就是說(shuō)啟動(dòng)子是指能啟動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄的序列,啟動(dòng)子對(duì)基因的表達(dá)是必須的,如果一個(gè)基因要表達(dá),那么它的前面一定要有一段啟動(dòng)子序列,RNA聚合酶等蛋白會(huì)結(jié)合到啟動(dòng)子上才能開(kāi)始基因的轉(zhuǎn)錄。但真核生物基因在無(wú)轉(zhuǎn)錄因子時(shí)處于不表達(dá)狀態(tài),因?yàn)镽NA聚合酶自身無(wú)法啟動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄,只有當(dāng)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合到其識(shí)別的DNA序列上后,基因才開(kāi)始表達(dá)。


pGL3-Basic Map.pngPGL3-Promoter Map.png

常用載體:pGL3-Basic(左) 、pGL3-Promoter(右)

特點(diǎn)

雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)具有如下特點(diǎn):

(1)靈敏度高、動(dòng)態(tài)范圍廣、應(yīng)用靈活;

(2)轉(zhuǎn)錄后無(wú)需翻譯即具有生物活性;

(3)實(shí)驗(yàn)中報(bào)告基因和對(duì)照基因的酶沒(méi)有種源同源性;

(4)螢火蟲(chóng)熒光素酶和海腎熒光素酶對(duì)應(yīng)不同的反應(yīng)底物,反應(yīng)中不存在交叉干擾。


轉(zhuǎn)錄因子與啟動(dòng)子研究主要包含:

(1)啟動(dòng)子活性驗(yàn)證:驗(yàn)證轉(zhuǎn)錄因子與啟動(dòng)子是否存在相互作用;

(2)轉(zhuǎn)錄因子與啟動(dòng)子作用位點(diǎn)研究:通過(guò)截短、潛在結(jié)合位點(diǎn)突變驗(yàn)證轉(zhuǎn)錄因子與啟動(dòng)子的結(jié)合位點(diǎn)。


轉(zhuǎn)錄因子與啟動(dòng)子.png

轉(zhuǎn)錄因子與啟動(dòng)子調(diào)控示意圖

服務(wù)流程
優(yōu)勢(shì)

(1)吉滿生物可根據(jù)客戶需求提供實(shí)驗(yàn)方案,評(píng)估項(xiàng)目可行性,提供一站式服務(wù);

(2)吉滿生物具有豐富的分子克隆報(bào)告基因檢測(cè)經(jīng)驗(yàn),可快速獲得結(jié)果,周期較短。

案例展示
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類(lèi)
轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控/promoter活性研究
簡(jiǎn)介

轉(zhuǎn)錄因子是一類(lèi)參與基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控的重要調(diào)節(jié)因子。不同轉(zhuǎn)錄因子的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域識(shí)別不同基因啟動(dòng)子區(qū)特定的堿基序列,行使抑制或激活該基因轉(zhuǎn)錄的功能。將目的基因啟動(dòng)子區(qū)域(通常取轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)TSS上游-2000bp)、或針對(duì)結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行突變、或分段截?cái)嘈蛄校瑯?gòu)建到報(bào)告基因載體luciferase的上游,共轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)錄因子過(guò)表達(dá)質(zhì)粒,通過(guò)熒光素酶活反映轉(zhuǎn)錄因子對(duì)啟動(dòng)子活性的調(diào)控作用。

啟動(dòng)子是基因的一個(gè)組成部分,作為基因表達(dá)的“開(kāi)關(guān)”,控制基因表達(dá)的起始時(shí)間和表達(dá)的程度。啟動(dòng)子本身并不控制基因活動(dòng),而是通過(guò)與稱(chēng)為轉(zhuǎn)錄因子的這種具有特殊結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)結(jié)合而控制基因活動(dòng)的。也就是說(shuō)啟動(dòng)子是指能啟動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄的序列,啟動(dòng)子對(duì)基因的表達(dá)是必須的,如果一個(gè)基因要表達(dá),那么它的前面一定要有一段啟動(dòng)子序列,RNA聚合酶等蛋白會(huì)結(jié)合到啟動(dòng)子上才能開(kāi)始基因的轉(zhuǎn)錄。但真核生物基因在無(wú)轉(zhuǎn)錄因子時(shí)處于不表達(dá)狀態(tài),因?yàn)镽NA聚合酶自身無(wú)法啟動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄,只有當(dāng)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合到其識(shí)別的DNA序列上后,基因才開(kāi)始表達(dá)。


pGL3-Basic Map.pngPGL3-Promoter Map.png

常用載體:pGL3-Basic(左) 、pGL3-Promoter(右)

特點(diǎn)

雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)具有如下特點(diǎn):

(1)靈敏度高、動(dòng)態(tài)范圍廣、應(yīng)用靈活;

(2)轉(zhuǎn)錄后無(wú)需翻譯即具有生物活性;

(3)實(shí)驗(yàn)中報(bào)告基因和對(duì)照基因的酶沒(méi)有種源同源性;

(4)螢火蟲(chóng)熒光素酶和海腎熒光素酶對(duì)應(yīng)不同的反應(yīng)底物,反應(yīng)中不存在交叉干擾。


轉(zhuǎn)錄因子與啟動(dòng)子研究主要包含:

(1)啟動(dòng)子活性驗(yàn)證:驗(yàn)證轉(zhuǎn)錄因子與啟動(dòng)子是否存在相互作用;

(2)轉(zhuǎn)錄因子與啟動(dòng)子作用位點(diǎn)研究:通過(guò)截短、潛在結(jié)合位點(diǎn)突變驗(yàn)證轉(zhuǎn)錄因子與啟動(dòng)子的結(jié)合位點(diǎn)。


轉(zhuǎn)錄因子與啟動(dòng)子.png

轉(zhuǎn)錄因子與啟動(dòng)子調(diào)控示意圖

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(1)吉滿生物可根據(jù)客戶需求提供實(shí)驗(yàn)方案,評(píng)估項(xiàng)目可行性,提供一站式服務(wù);

(2)吉滿生物具有豐富的分子克隆報(bào)告基因檢測(cè)經(jīng)驗(yàn),可快速獲得結(jié)果,周期較短。

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