Cre-loxP重組酶系統(tǒng)包括Cre重組酶和loxP序列,是一種特定位點(diǎn)的重組技術(shù)。Cre重組酶(cyclization recombination)是從P1噬菌體中發(fā)現(xiàn),屬于λInt酶超基因家族。Cre重組酶基因編碼區(qū)序列全長(zhǎng)1029bp,編碼由343個(gè)氨基酸組成的38kDa單體蛋白。它不僅具有催化活性,而且與限制酶相似,它不借助任何輔助因子,能識(shí)別特異的DNA序列,即loxP位點(diǎn),使loxP位點(diǎn)間的基因序列被刪除、插入、易位或倒位。
LoxP(locus of X(cross)-overinP1)序列是由兩個(gè)13bp反向重復(fù)序列和中間間隔的8bp序列共同組成,Cre在催化DNA鏈交換過(guò)程中與DNA共價(jià)結(jié)合,反向重復(fù)序列是Cre重組酶的特異識(shí)別位點(diǎn),而8bp的間隔區(qū)域決定了loxP位點(diǎn)的方向。
圖:CRE作用原理