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干擾質(zhì)粒構(gòu)建
簡介

根據(jù)客戶研究的目的基因設(shè)計(jì)shRNA,并將其克隆到相應(yīng)的載體,轉(zhuǎn)染細(xì)胞即可實(shí)現(xiàn)抑制基因表達(dá)的目的;與化學(xué)合成的siRNA相比,質(zhì)粒性質(zhì)更穩(wěn)定,且對基因的抑制持續(xù)時間更長。

RNA干擾現(xiàn)象是一種進(jìn)化上保守的抵御轉(zhuǎn)基因或外來病毒侵犯的防御機(jī)制,將與靶基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA存在同源互補(bǔ)序列的雙鏈RNA導(dǎo)入細(xì)胞后,能特異性地降解該mRNA,從而產(chǎn)生相應(yīng)的功能表型缺失。

RNAi提供了一種經(jīng)濟(jì)、快捷、高效的抑制特異基因表達(dá)的技術(shù)手段,使用RNAi技術(shù)可以特異性剔除或關(guān)閉特定基因的表達(dá),有助于研究該基因在生物模型系統(tǒng)中的作用,是研究基因功能的重要工具,并且逐步成為病毒性疾病、遺傳性疾病以及腫瘤等的基因治療研究的一種手段。

特點(diǎn)

shRNA是可以克隆至表達(dá)載體并表達(dá)雙鏈siRNA的RNA分子,包括兩個短反向重復(fù)序列,中間由一莖環(huán)序列分隔,形成發(fā)夾結(jié)構(gòu),由polⅢ啟動子控制。相對于siRNA,shRNA在細(xì)胞核中合成,進(jìn)一步加工并運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞質(zhì)中,然后進(jìn)入RISC發(fā)揮活性。miRNA的合成與成熟研究為shRNA的合成,特別是基于miR-30的shRNA的合成提供了基礎(chǔ)。

shRNA表達(dá)載體進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)后,需要轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞核中進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。初級轉(zhuǎn)錄本(Pri-shRNA)由Drosha/DGCR8復(fù)合物處理形成pre-shRNA。Pre-shRNA被運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞質(zhì)中,裝載到Dicer/TRBP/PACT復(fù)合物上,隨后被進(jìn)一步加工成成熟的shRNA。成熟shRNA與含有RISC的Argonaute蛋白相關(guān),介導(dǎo)mRNA的切割和降解或處理小體(P-bodies)的翻譯抑制,行使RNA干擾功能。

服務(wù)流程
優(yōu)勢

(1)吉滿生物具有專業(yè)的技術(shù)研究團(tuán)隊(duì)和豐富的分子克隆經(jīng)驗(yàn);

(2)吉滿生物目前已有多種工具載體可選,應(yīng)用于各種表達(dá)系統(tǒng);

(3)可根據(jù)客戶需求構(gòu)建不同的目的載體。

案例展示
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干擾質(zhì)粒構(gòu)建
簡介

根據(jù)客戶研究的目的基因設(shè)計(jì)shRNA,并將其克隆到相應(yīng)的載體,轉(zhuǎn)染細(xì)胞即可實(shí)現(xiàn)抑制基因表達(dá)的目的;與化學(xué)合成的siRNA相比,質(zhì)粒性質(zhì)更穩(wěn)定,且對基因的抑制持續(xù)時間更長。

RNA干擾現(xiàn)象是一種進(jìn)化上保守的抵御轉(zhuǎn)基因或外來病毒侵犯的防御機(jī)制,將與靶基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA存在同源互補(bǔ)序列的雙鏈RNA導(dǎo)入細(xì)胞后,能特異性地降解該mRNA,從而產(chǎn)生相應(yīng)的功能表型缺失。

RNAi提供了一種經(jīng)濟(jì)、快捷、高效的抑制特異基因表達(dá)的技術(shù)手段,使用RNAi技術(shù)可以特異性剔除或關(guān)閉特定基因的表達(dá),有助于研究該基因在生物模型系統(tǒng)中的作用,是研究基因功能的重要工具,并且逐步成為病毒性疾病、遺傳性疾病以及腫瘤等的基因治療研究的一種手段。

特點(diǎn)

shRNA是可以克隆至表達(dá)載體并表達(dá)雙鏈siRNA的RNA分子,包括兩個短反向重復(fù)序列,中間由一莖環(huán)序列分隔,形成發(fā)夾結(jié)構(gòu),由polⅢ啟動子控制。相對于siRNA,shRNA在細(xì)胞核中合成,進(jìn)一步加工并運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞質(zhì)中,然后進(jìn)入RISC發(fā)揮活性。miRNA的合成與成熟研究為shRNA的合成,特別是基于miR-30的shRNA的合成提供了基礎(chǔ)。

shRNA表達(dá)載體進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)后,需要轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞核中進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。初級轉(zhuǎn)錄本(Pri-shRNA)由Drosha/DGCR8復(fù)合物處理形成pre-shRNA。Pre-shRNA被運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞質(zhì)中,裝載到Dicer/TRBP/PACT復(fù)合物上,隨后被進(jìn)一步加工成成熟的shRNA。成熟shRNA與含有RISC的Argonaute蛋白相關(guān),介導(dǎo)mRNA的切割和降解或處理小體(P-bodies)的翻譯抑制,行使RNA干擾功能。

服務(wù)流程
優(yōu)勢

(1)吉滿生物具有專業(yè)的技術(shù)研究團(tuán)隊(duì)和豐富的分子克隆經(jīng)驗(yàn);

(2)吉滿生物目前已有多種工具載體可選,應(yīng)用于各種表達(dá)系統(tǒng);

(3)可根據(jù)客戶需求構(gòu)建不同的目的載體。

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