S蛋白是冠狀病毒最重要的表面膜蛋白,含有S1和S2兩個(gè)亞基。其中S1包含受體結(jié)合域(receptorbinding domain, RBD),負(fù)責(zé)識(shí)別細(xì)胞的受體。S2含有膜融合過(guò)程所需的基本元件。研究發(fā)現(xiàn),S蛋白介導(dǎo)受體結(jié)合和膜融合,對(duì)病毒感染宿主細(xì)胞起重要作用,此外,S蛋白上含有刺激中和抗體的主要抗原及細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞的重要靶標(biāo),是疫苗設(shè)計(jì)、治療性抗體和診斷方法的關(guān)鍵靶標(biāo)(Walls et al., 2020; Wang et al., 2020; Zhang et al., 2020)。
為避免傳統(tǒng)的SARS-CoV-S病毒中和試驗(yàn)需要操作活毒而存在的生物安全隱患,吉滿生物建立了基于假病毒系統(tǒng)的操作較安全的SARS-CoV-S中和試驗(yàn)技術(shù)平臺(tái)。本產(chǎn)品以HIV慢病毒載體和SARS-CoV-S蛋白為基礎(chǔ),將SARS-CoV-S蛋白替換慢病毒包膜蛋白VSVG,與慢病毒包裝質(zhì)粒和CMV-GFP-T2A-Luciferase質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,包裝SARS-CoV-S假病毒,表面表達(dá)SARS-CoV-S蛋白,并且同時(shí)攜帶GFP熒光和Luciferase熒光素酶報(bào)告基因,可通過(guò)觀察熒光和檢測(cè)熒光素酶活性評(píng)價(jià)假病毒感染細(xì)胞的活性,該假病毒無(wú)自主復(fù)制能力,安全性高,可用于SARS-CoV-S受體藥物篩選、中和抗體檢測(cè)及疫苗效果評(píng)價(jià)等。