過表達(dá)穩(wěn)定細(xì)胞系（Overexpression Stable Cell Lines）的構(gòu)建利用慢病毒感染、電轉(zhuǎn)等技術(shù)手段將特定的基因序列整合到宿主細(xì)胞的染色體上，使得目的基因能夠在宿主細(xì)胞內(nèi)長期且穩(wěn)定的表達(dá)。
目前常用的構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞系的基本原理是將外源DNA克隆到具有某種抗性的載體上，載體被轉(zhuǎn)染到宿主細(xì)胞并整合到宿主染色體中，用載體中所含的抗性標(biāo)志進行篩選。最常用的真核表達(dá)載體的抗性篩選標(biāo)志物有嘌呤霉素(puromycin)、殺稻瘟菌素（Blasticidin S）、潮霉素（hygromycin）和新霉素（neomycin），常用G418來代替新霉素進行選擇性篩選。通過篩選得到可穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白，或者穩(wěn)定表達(dá)沉默特定基因的細(xì)胞株。
慢病毒幾乎可以感染所有種類的細(xì)胞，并且在感染后可以整合到受感染細(xì)胞的基因組，進行長時間的穩(wěn)定表達(dá)，因此，慢病毒常用于制備穩(wěn)定表達(dá)/沉默特定基因的單克隆細(xì)胞株。
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