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干擾慢病毒
簡(jiǎn)介

RNA干擾(RNA interference, RNAi) 是一種進(jìn)化上保守的抵御轉(zhuǎn)基因或外來(lái)病毒侵犯的防御機(jī)制。將與靶基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA存在同源互補(bǔ)序列的雙鏈RNA(double strand RNA, dsRNA) 導(dǎo)入細(xì)胞后,能特異性地降解該mRNA,從而產(chǎn)生相應(yīng)的功能表型缺失。

RNAi提供了一種經(jīng)濟(jì)、快捷、高效的抑制特異基因表達(dá)的技術(shù)手段,有助于研究該基因在生物模型系統(tǒng)中的作用,是研究基因功能的重要工具,并且逐步成為病毒性疾病、遺傳性疾病以及腫瘤等的基因治療研究的一種手段?,F(xiàn)今發(fā)現(xiàn)的主要起干擾作用的RNAi主要有兩類小分子RNA:一類是microRNA(miRNA);另一類是siRNA (small interfering RNA)。

siRNA制備的方法一般有:化學(xué)合成siRNA,哺乳動(dòng)物細(xì)胞載體shRNA克隆和慢病毒載體shRNA克隆。

將慢病毒載體的shRNA質(zhì)粒與慢病毒包裝輔助質(zhì)粒和包膜質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,收集上清進(jìn)行濃縮純化,獲取高滴度的慢病毒,相對(duì)于SiRNA和shRNA質(zhì)粒,shRNA慢病毒的感染范圍更廣,如依賴轉(zhuǎn)染試劑難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞:原代細(xì)胞、懸浮細(xì)胞等,并可實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定、長(zhǎng)效抑制基因表達(dá)。


干擾原理.png

干擾原理(圖片來(lái)源:RNA Therapeutics Institute)

特點(diǎn)

與化學(xué)合成siRNA和基于瞬時(shí)表達(dá)載體構(gòu)建的shRNA相比,利用慢病毒構(gòu)建的shRNA:一方面可以擴(kuò)增瞬時(shí)表達(dá)的載體使用,另一方面,lentivirus-shRNA克隆經(jīng)過慢病毒包裝系統(tǒng)包裝后,可用于感染傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染試劑難于轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系如原代細(xì)胞,懸浮細(xì)胞和處于非分裂狀態(tài)的細(xì)胞,并且在感染后可以整合到受感染細(xì)胞的基因組,進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的穩(wěn)定表達(dá)。

吉滿生物科技(上海)有限公司主要提供以慢病毒為主的應(yīng)用于臨床前細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)和整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的針對(duì)不同基因和藥物靶標(biāo)的各種即用型病毒顆粒。利用相關(guān)載體把shRNA導(dǎo)入細(xì)胞,載體中的U6啟動(dòng)子確保shRNA表達(dá);這種裝載了shRNA載體可被傳遞到子代細(xì)胞中去,從而使基因的沉默是可遺傳的。


推薦使用:

(1)適用于在難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中進(jìn)行的RNA干擾研究,如原代神經(jīng)細(xì)胞,干細(xì)胞,腫瘤細(xì)胞等;

(2)適用于快速建立穩(wěn)定表達(dá)沉默特定基因的細(xì)胞株;

(3)適用于In vivo 實(shí)驗(yàn),包括穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株成瘤實(shí)驗(yàn)、局部注射等;

(4)適用于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物,特別是轉(zhuǎn)基因大鼠的制備。

服務(wù)流程
優(yōu)勢(shì)

(1)吉滿生物專注提供病毒包裝服務(wù)十余年,慢病毒包裝服務(wù)經(jīng)驗(yàn)豐富!

(2)ISO9001認(rèn)證的質(zhì)量體系,嚴(yán)格的病毒純化工藝!

(3)上萬(wàn)篇SCI期刊引用,包括Cell、Science、Nature等頂級(jí)期刊!

(4)技術(shù)團(tuán)隊(duì)響應(yīng)快、服務(wù)好 從質(zhì)粒構(gòu)建到病毒包裝僅需5周即可發(fā)貨!

(5)完善的客戶服務(wù)體系,技術(shù)支持、項(xiàng)目跟進(jìn)、售后服務(wù)獲得客戶一致好評(píng),確保您訂購(gòu)無(wú)憂!

案例展示
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干擾慢病毒
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RNA干擾(RNA interference, RNAi) 是一種進(jìn)化上保守的抵御轉(zhuǎn)基因或外來(lái)病毒侵犯的防御機(jī)制。將與靶基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA存在同源互補(bǔ)序列的雙鏈RNA(double strand RNA, dsRNA) 導(dǎo)入細(xì)胞后,能特異性地降解該mRNA,從而產(chǎn)生相應(yīng)的功能表型缺失。

RNAi提供了一種經(jīng)濟(jì)、快捷、高效的抑制特異基因表達(dá)的技術(shù)手段,有助于研究該基因在生物模型系統(tǒng)中的作用,是研究基因功能的重要工具,并且逐步成為病毒性疾病、遺傳性疾病以及腫瘤等的基因治療研究的一種手段?,F(xiàn)今發(fā)現(xiàn)的主要起干擾作用的RNAi主要有兩類小分子RNA:一類是microRNA(miRNA);另一類是siRNA (small interfering RNA)。

siRNA制備的方法一般有:化學(xué)合成siRNA,哺乳動(dòng)物細(xì)胞載體shRNA克隆和慢病毒載體shRNA克隆。

將慢病毒載體的shRNA質(zhì)粒與慢病毒包裝輔助質(zhì)粒和包膜質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,收集上清進(jìn)行濃縮純化,獲取高滴度的慢病毒,相對(duì)于SiRNA和shRNA質(zhì)粒,shRNA慢病毒的感染范圍更廣,如依賴轉(zhuǎn)染試劑難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞:原代細(xì)胞、懸浮細(xì)胞等,并可實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定、長(zhǎng)效抑制基因表達(dá)。


干擾原理.png

干擾原理(圖片來(lái)源:RNA Therapeutics Institute)

特點(diǎn)

與化學(xué)合成siRNA和基于瞬時(shí)表達(dá)載體構(gòu)建的shRNA相比,利用慢病毒構(gòu)建的shRNA:一方面可以擴(kuò)增瞬時(shí)表達(dá)的載體使用,另一方面,lentivirus-shRNA克隆經(jīng)過慢病毒包裝系統(tǒng)包裝后,可用于感染傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染試劑難于轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系如原代細(xì)胞,懸浮細(xì)胞和處于非分裂狀態(tài)的細(xì)胞,并且在感染后可以整合到受感染細(xì)胞的基因組,進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的穩(wěn)定表達(dá)。

吉滿生物科技(上海)有限公司主要提供以慢病毒為主的應(yīng)用于臨床前細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)和整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的針對(duì)不同基因和藥物靶標(biāo)的各種即用型病毒顆粒。利用相關(guān)載體把shRNA導(dǎo)入細(xì)胞,載體中的U6啟動(dòng)子確保shRNA表達(dá);這種裝載了shRNA載體可被傳遞到子代細(xì)胞中去,從而使基因的沉默是可遺傳的。


推薦使用:

(1)適用于在難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中進(jìn)行的RNA干擾研究,如原代神經(jīng)細(xì)胞,干細(xì)胞,腫瘤細(xì)胞等;

(2)適用于快速建立穩(wěn)定表達(dá)沉默特定基因的細(xì)胞株;

(3)適用于In vivo 實(shí)驗(yàn),包括穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株成瘤實(shí)驗(yàn)、局部注射等;

(4)適用于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物,特別是轉(zhuǎn)基因大鼠的制備。

服務(wù)流程
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(1)吉滿生物專注提供病毒包裝服務(wù)十余年,慢病毒包裝服務(wù)經(jīng)驗(yàn)豐富!

(2)ISO9001認(rèn)證的質(zhì)量體系,嚴(yán)格的病毒純化工藝!

(3)上萬(wàn)篇SCI期刊引用,包括Cell、Science、Nature等頂級(jí)期刊!

(4)技術(shù)團(tuán)隊(duì)響應(yīng)快、服務(wù)好 從質(zhì)粒構(gòu)建到病毒包裝僅需5周即可發(fā)貨!

(5)完善的客戶服務(wù)體系,技術(shù)支持、項(xiàng)目跟進(jìn)、售后服務(wù)獲得客戶一致好評(píng),確保您訂購(gòu)無(wú)憂!

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