小動物活體成像簡介
較傳統(tǒng)屠宰動物相比,小動物活體成像技術(shù)能夠直接監(jiān)控活體生物體內(nèi)的細(xì)胞活動和基因行為。通過光學(xué)檢測設(shè)備,可以觀測活體動物體內(nèi)腫瘤的生長及轉(zhuǎn)移,感染性疾病發(fā)展過程、特定基因的表達(dá)等生物學(xué)過程。同時實(shí)現(xiàn)了同一種實(shí)驗對象在不同時間點(diǎn)進(jìn)行記錄,跟蹤同一觀察目標(biāo)(標(biāo)記細(xì)胞及基因)的移動及變化,使得數(shù)據(jù)更加真實(shí)可信。
目前主要采用生物發(fā)光(Bioluminescence)和熒光(Fluorescence)兩種技術(shù)(比較見表1),已廣泛應(yīng)用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,主要有以下幾個方面:
1.標(biāo)記細(xì)胞,如癌癥(腫瘤示蹤)及藥物研究、干細(xì)胞研究、細(xì)胞凋亡研究;
2.標(biāo)記DNA及RNA,特別是基因治療方面的應(yīng)用;
3.標(biāo)記基因,如轉(zhuǎn)基因動物模型研究,基因表達(dá)和藥物代謝研究;
4.標(biāo)記細(xì)菌,如研究蛋白質(zhì)相互作用、代謝等。利用活體生物熒光成像技術(shù)可以檢測到,并能連續(xù)觀察其對機(jī)體的侵染過程以及抗病毒藥物和抗生素對其病理過程的影響。
優(yōu) 點(diǎn) | 缺 點(diǎn) | |
生物發(fā)光 熒光素酶(Luciferase) | 特異性強(qiáng),靈敏度高,且無自發(fā)熒光;能夠進(jìn)行精確定量 | 信號較弱,檢測時間較長;需要高度靈敏的儀器設(shè)備;需要底物; |
熒光成像 熒光蛋白(如GFP,RFP等) | 信號強(qiáng)度大,可直接觀察成像;有多種蛋白和染料可用 | 存在非特異性熒光;檢測深度受到局限; 需要不同波長激發(fā)光,難精確體內(nèi)定量; |
(表1 比較生物發(fā)光與熒光)
案例展示
案例一:Tissue Factor-Targeted ImmunoPET Imaging and Radioimmunotherapy of Anaplastic Thyroid Cancer
發(fā)表期刊:Advanced Science
影響因子:17.5213
發(fā)表單位:上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院
吉滿助力
本研究借助pGMLV-CMV-Lu(Genomeditech)慢病毒標(biāo)記THJ-16T腫瘤細(xì)胞,并成功構(gòu)建了甲狀腺癌(ATC)動物模型。64Cu-NOTA-ALT-836在皮下ATC模型中的免疫PET成像如圖,在注射示蹤劑48小時后,最大強(qiáng)度投影(MIP,圖A)和冠狀位(圖B)免疫PET圖像很好地顯示了THJ-16T腫瘤的清晰輪廓,白色虛線圈表示腫瘤。
案例二:YAP-activated SATB2 is a coactivator of NRF2 that amplifies anti-oxidative capacity and promotes tumor progression in renal cell carcinoma
影響因子:13.312
發(fā)表單位:浙江中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院
吉滿助力
使用CMV-Luc-PGK-puro(Genomeditech)慢病毒標(biāo)記腫瘤細(xì)胞。左圖代表尾靜脈注射含有對照和786-O-luciferase SATB2-KO細(xì)胞后的動態(tài)肺轉(zhuǎn)移信號,結(jié)果顯示SATB2缺失顯著抑制了腫瘤細(xì)胞的遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移。右圖中與對照組相比,過表達(dá)SATB2可以有效地增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞A498肺轉(zhuǎn)移的能力。
案例三:Endothelial cells promote metastasis of prostate cancer by enhancing autophagy
發(fā)表期刊:Journal of Experimental & Clinical Cancer Research
影響因子:12.6575
發(fā)表單位:上海市第一人民醫(yī)院
吉滿助力
使用CMV-RFP-T2A- Luciferase(Genomeditech)慢病毒轉(zhuǎn)染高轉(zhuǎn)移的C4-2前列腺癌細(xì)胞系。將C4-2與人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)混合,原位注射于小鼠前列腺背側(cè)。通過生物發(fā)光成像監(jiān)測腫瘤轉(zhuǎn)移情況。結(jié)果顯示在第70天對照組62.5% (5/8) ,Maraviroc 組50%(4/8)和CQ組50% (4/8)的小鼠出現(xiàn)轉(zhuǎn)移性病變。
部分客戶引文
IF=17.5213 Wei W, Liu Q, Jiang D, Zhao H, Kutyreff CJ, Engle JW, Liu J, Cai W. Tissue Factor-Targeted ImmunoPET Imaging and Radioimmunotherapy of Anaplastic Thyroid Cancer. Adv Sci (Weinh). 2020 May 17;7(13):1903595. |
IF=13.312 Jin J, Chen F, He W, Zhao L, Lin B, Zheng D, Chen L, He H, He Q. YAP-Activated SATB2 Is a Coactivator of NRF2 That Amplifies Antioxidative Capacity and Promotes Tumor Progression in Renal Cell Carcinoma. Cancer Res. 2023 Mar 2;83(5):786-803. |
IF=12.6575 Zhao R, Bei X, Yang B, Wang X, Jiang C, Shi F, Wang X, Zhu Y, Jing Y, Han B, Xia S, Jiang Q. Endothelial cells promote metastasis of prostate cancer by enhancing autophagy. J Exp Clin Cancer Res. 2018 Sep 10;37(1):221. |
IF=10.334 Wang Q, Wu M, Li H, Rao X, Ao L, Wang H, Yao L, Wang X, Hong X, Wang J, Aa J, Sun M, Wang G, Liu J, Zhou F. Therapeutic targeting of glutamate dehydrogenase 1 that links metabolic reprogramming and Snail-mediated epithelial-mesenchymal transition in drug-resistant lung cancer. Pharmacol Res. 2022 Nov;185:106490. |
IF=10.0567 Wei W, Jiang D, Lee HJ, Li M, Kutyreff CJ, Engle JW, Liu J, Cai W. Development and characterization of CD54-targeted immunoPET imaging in solid tumors. Eur J Nucl Med Mol Imaging. 2020 Nov;47(12):2765-2775. |
產(chǎn)品清單
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