研究背景
近視是全世界兒童和青少年最常見的眼病之一，目前臨床上尚無有效的治療方法。眼組織纖維化參與了近視眼的發(fā)生發(fā)展，但詳細(xì)的機(jī)制還未得到充分的研究和報(bào)道。
文獻(xiàn)來源
2023年3月，山東中醫(yī)藥大學(xué)郭大東團(tuán)隊(duì)在《Biochemical Pharmacology》發(fā)表題為“Inhibitory effect of miR-138-5p on choroidal fibrosis in lens-induced myopia guinea pigs via suppressing the HIF-1α signaling pathway”的研究論文，探討了miR-138-5p通過調(diào)節(jié)HIF-1α信號通路對豚鼠近視眼脈絡(luò)膜纖維化的影響。研究結(jié)果表明，miR-138-5p通過抑制HIF-1α信號通路下調(diào)與纖維化相關(guān)基因TGF-β1、collagn l、HYP、IL-1β、TNF-α和α-SMA的表達(dá)，可有效降低實(shí)驗(yàn)組透鏡誘導(dǎo)型近視豚鼠的屈光率和眼長，改善脈絡(luò)膜纖維化，從而起到延緩近視進(jìn)展的作用。
項(xiàng)目研究
為了探索miR-138-5p病毒治療對豚鼠眼睛屈光狀、其他眼部參數(shù)以及纖維化的影響，研究人員建立了豚鼠近視眼模型,將豚鼠分為正常對照組(NC)和透鏡誘導(dǎo)組(LIM),LIM+mir-138-5p病毒治療(LV)組和LIM+ mir-138-5p載體治療組(VECTOR)。
誘導(dǎo)近視2周和4周后，豚鼠眼睛的屈光度降低，眼軸長度增加(圖1），LIM組豚鼠脈絡(luò)膜組織厚度變薄(圖2)，纖維化程度加重(圖3)，而經(jīng)過miR-138-5p干預(yù)后，實(shí)驗(yàn)性近視豚鼠的屈光度減小，眼軸長度有效降低(圖1)，豚鼠脈絡(luò)膜組織厚度提高(圖2)，纖維化程度減弱(圖3)。結(jié)果表明，miR-138-5p干預(yù)后，近視豚鼠脈絡(luò)膜纖維化趨勢被抑制，從而改善近視進(jìn)展。
（圖1 在近視眼誘導(dǎo)2周和4周后，NC組、LIM組、LV組和VECTOR組的屈光和眼軸長度的變化）
（圖2 近視眼誘導(dǎo)4周后豚鼠脈絡(luò)膜厚度的比較）
（圖3 誘導(dǎo)4周后眼組織的Masson染色）
研究人員通過雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)來研究miR-138-5p和HIF-1α之間的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)miR-138b-5p顯著抑制HIF-1α野生型熒光質(zhì)粒的熒光素酶活性，而miR-138b-5p對HIF-1α野生型熒光質(zhì)粒無顯著調(diào)控效果(圖4)，這些結(jié)果表明，HIF-1α是miR-138-5p調(diào)控的靶基因。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，誘導(dǎo)近視組miR-138-5p mRNA水平顯著降低，而HIF-1α、TGF-β1、collagn l和α-SMA mRNA均顯著升高(圖5,圖6)，HYP含量降低(圖7)。綜上所述，miR-138-5p通過抑制HIF-1α信號通路下調(diào)與纖維化相關(guān)的TGF-β1、collagn l、HYP、IL-1β、TNF-α和α-SMA的表達(dá)。
（圖4 雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證miR-138-5p靶向HIF-1α）
（圖5 qPCR分析不同處理2周和4周脈絡(luò)膜組織中HIF-1α,TGF-β1,collagn l,α-SMA和miR-138-5p水平）
（圖6 Western blot檢測miR-138-5p治療2周和4周后，LIM豚鼠脈絡(luò)膜組織中HIF-1α,TGF-β1,collagn I和α-SMA水平）
（圖7 miR-138-5p載體在各組脈絡(luò)膜中HYP的表達(dá)）
綜上所述，該研究證實(shí)了透鏡誘導(dǎo)的近視豚鼠脈絡(luò)膜厚度降低并呈纖維化趨勢，與眼軸長度的延長呈正相關(guān)。miR-138-5p可通過抑制HIF-1α信號通路，有效降低TGF-β1、α-SMA、HYP、IL-1β、TNF-α、collagn l的表達(dá)，減輕近視眼豚鼠脈絡(luò)膜纖維化過程。研究結(jié)果表明hif -1α介導(dǎo)的脈絡(luò)膜纖維化可能是預(yù)防近視的一個(gè)新的潛在靶點(diǎn)，為在臨床實(shí)踐中使用microRNAs控制近視發(fā)展提供了新的見解。
吉滿助力
產(chǎn)品名稱：miR-138-5p過表達(dá)慢病毒和對照慢病毒(genomeditech) 所選載體：PGMLV-6395:PGMLV-CMV-MCS-EF1-ZsGreen1-T2A-Puro 注射體積：5μl 病毒滴度：1×108TU/mL 如想了解更多質(zhì)粒構(gòu)建,病毒包裝,穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建,敲除細(xì)胞株,報(bào)告基因檢測等相關(guān)服務(wù)。歡迎訪問吉滿生物官網(wǎng)：zxpdf.cn 免費(fèi)咨詢電話：400-627-9288
