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山東中醫(yī)藥大學(xué) | miR-138-5p調(diào)節(jié)HIF-1α信號對近視豚鼠脈絡(luò)膜纖維化起抑制作用
吉滿生物
2024-10-12

研究背景


近視是全世界兒童和青少年最常見的眼病之一,目前臨床上尚無有效的治療方法。眼組織纖維化參與了近視眼的發(fā)生發(fā)展,但詳細(xì)的機(jī)制還未得到充分的研究和報(bào)道。


文獻(xiàn)來源


2023年3月,山東中醫(yī)藥大學(xué)郭大東團(tuán)隊(duì)在《Biochemical Pharmacology》發(fā)表題為“Inhibitory effect of miR-138-5p on choroidal fibrosis in lens-induced myopia guinea pigs via suppressing the HIF-1α signaling pathway”的研究論文,探討了miR-138-5p通過調(diào)節(jié)HIF-1α信號通路對豚鼠近視眼脈絡(luò)膜纖維化的影響。研究結(jié)果表明,miR-138-5p通過抑制HIF-1α信號通路下調(diào)與纖維化相關(guān)基因TGF-β1、collagn l、HYP、IL-1β、TNF-α和α-SMA的表達(dá),可有效降低實(shí)驗(yàn)組透鏡誘導(dǎo)型近視豚鼠的屈光率和眼長,改善脈絡(luò)膜纖維化,從而起到延緩近視進(jìn)展的作用。



項(xiàng)目研究


為了探索miR-138-5p病毒治療對豚鼠眼睛屈光狀、其他眼部參數(shù)以及纖維化的影響,研究人員建立了豚鼠近視眼模型,將豚鼠分為正常對照組(NC)和透鏡誘導(dǎo)組(LIM),LIM+mir-138-5p病毒治療(LV)組和LIM+ mir-138-5p載體治療組(VECTOR)。


誘導(dǎo)近視2周和4周后,豚鼠眼睛的屈光度降低,眼軸長度增加(圖1),LIM組豚鼠脈絡(luò)膜組織厚度變薄(圖2),纖維化程度加重(圖3),而經(jīng)過miR-138-5p干預(yù)后,實(shí)驗(yàn)性近視豚鼠的屈光度減小,眼軸長度有效降低(圖1),豚鼠脈絡(luò)膜組織厚度提高(圖2),纖維化程度減弱(圖3)。結(jié)果表明,miR-138-5p干預(yù)后,近視豚鼠脈絡(luò)膜纖維化趨勢被抑制,從而改善近視進(jìn)展。


(圖1 在近視眼誘導(dǎo)2周和4周后,NC組、LIM組、LV組和VECTOR組的屈光和眼軸長度的變化)


(圖2  近視眼誘導(dǎo)4周后豚鼠脈絡(luò)膜厚度的比較)


(圖3  誘導(dǎo)4周后眼組織的Masson染色)


研究人員通過雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)來研究miR-138-5p和HIF-1α之間的關(guān)系,發(fā)現(xiàn)miR-138b-5p顯著抑制HIF-1α野生型熒光質(zhì)粒的熒光素酶活性,而miR-138b-5p對HIF-1α野生型熒光質(zhì)粒無顯著調(diào)控效果(圖4),這些結(jié)果表明,HIF-1α是miR-138-5p調(diào)控的靶基因。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),誘導(dǎo)近視組miR-138-5p mRNA水平顯著降低,而HIF-1α、TGF-β1、collagn l和α-SMA mRNA均顯著升高(圖5,圖6),HYP含量降低(圖7)。綜上所述,miR-138-5p通過抑制HIF-1α信號通路下調(diào)與纖維化相關(guān)的TGF-β1、collagn l、HYP、IL-1β、TNF-α和α-SMA的表達(dá)。


(圖4 雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證miR-138-5p靶向HIF-1α)


(圖5 qPCR分析不同處理2周和4周脈絡(luò)膜組織中HIF-1α,TGF-β1,collagn l,α-SMA和miR-138-5p水平)


(圖6  Western blot檢測miR-138-5p治療2周和4周后,LIM豚鼠脈絡(luò)膜組織中HIF-1α,TGF-β1,collagn I和α-SMA水平)


(圖7 miR-138-5p載體在各組脈絡(luò)膜中HYP的表達(dá))


綜上所述,該研究證實(shí)了透鏡誘導(dǎo)的近視豚鼠脈絡(luò)膜厚度降低并呈纖維化趨勢,與眼軸長度的延長呈正相關(guān)。miR-138-5p可通過抑制HIF-1α信號通路,有效降低TGF-β1、α-SMA、HYP、IL-1β、TNF-α、collagn l的表達(dá),減輕近視眼豚鼠脈絡(luò)膜纖維化過程。研究結(jié)果表明hif -1α介導(dǎo)的脈絡(luò)膜纖維化可能是預(yù)防近視的一個(gè)新的潛在靶點(diǎn),為在臨床實(shí)踐中使用microRNAs控制近視發(fā)展提供了新的見解。


吉滿助力


產(chǎn)品名稱:miR-138-5p過表達(dá)慢病毒和對照慢病毒(genomeditech)

所選載體:PGMLV-6395:PGMLV-CMV-MCS-EF1-ZsGreen1-T2A-Puro

注射體積:5μl

病毒滴度:1×108TU/mL


如想了解更多質(zhì)粒構(gòu)建,病毒包裝,穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建,敲除細(xì)胞株,報(bào)告基因檢測等相關(guān)服務(wù)。歡迎訪問吉滿生物官網(wǎng):zxpdf.cn

免費(fèi)咨詢電話:400-627-9288

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吉滿生物
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研究背景


近視是全世界兒童和青少年最常見的眼病之一,目前臨床上尚無有效的治療方法。眼組織纖維化參與了近視眼的發(fā)生發(fā)展,但詳細(xì)的機(jī)制還未得到充分的研究和報(bào)道。


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2023年3月,山東中醫(yī)藥大學(xué)郭大東團(tuán)隊(duì)在《Biochemical Pharmacology》發(fā)表題為“Inhibitory effect of miR-138-5p on choroidal fibrosis in lens-induced myopia guinea pigs via suppressing the HIF-1α signaling pathway”的研究論文,探討了miR-138-5p通過調(diào)節(jié)HIF-1α信號通路對豚鼠近視眼脈絡(luò)膜纖維化的影響。研究結(jié)果表明,miR-138-5p通過抑制HIF-1α信號通路下調(diào)與纖維化相關(guān)基因TGF-β1、collagn l、HYP、IL-1β、TNF-α和α-SMA的表達(dá),可有效降低實(shí)驗(yàn)組透鏡誘導(dǎo)型近視豚鼠的屈光率和眼長,改善脈絡(luò)膜纖維化,從而起到延緩近視進(jìn)展的作用。



項(xiàng)目研究


為了探索miR-138-5p病毒治療對豚鼠眼睛屈光狀、其他眼部參數(shù)以及纖維化的影響,研究人員建立了豚鼠近視眼模型,將豚鼠分為正常對照組(NC)和透鏡誘導(dǎo)組(LIM),LIM+mir-138-5p病毒治療(LV)組和LIM+ mir-138-5p載體治療組(VECTOR)。


誘導(dǎo)近視2周和4周后,豚鼠眼睛的屈光度降低,眼軸長度增加(圖1),LIM組豚鼠脈絡(luò)膜組織厚度變薄(圖2),纖維化程度加重(圖3),而經(jīng)過miR-138-5p干預(yù)后,實(shí)驗(yàn)性近視豚鼠的屈光度減小,眼軸長度有效降低(圖1),豚鼠脈絡(luò)膜組織厚度提高(圖2),纖維化程度減弱(圖3)。結(jié)果表明,miR-138-5p干預(yù)后,近視豚鼠脈絡(luò)膜纖維化趨勢被抑制,從而改善近視進(jìn)展。


(圖1 在近視眼誘導(dǎo)2周和4周后,NC組、LIM組、LV組和VECTOR組的屈光和眼軸長度的變化)


(圖2  近視眼誘導(dǎo)4周后豚鼠脈絡(luò)膜厚度的比較)


(圖3  誘導(dǎo)4周后眼組織的Masson染色)


研究人員通過雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)來研究miR-138-5p和HIF-1α之間的關(guān)系,發(fā)現(xiàn)miR-138b-5p顯著抑制HIF-1α野生型熒光質(zhì)粒的熒光素酶活性,而miR-138b-5p對HIF-1α野生型熒光質(zhì)粒無顯著調(diào)控效果(圖4),這些結(jié)果表明,HIF-1α是miR-138-5p調(diào)控的靶基因。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),誘導(dǎo)近視組miR-138-5p mRNA水平顯著降低,而HIF-1α、TGF-β1、collagn l和α-SMA mRNA均顯著升高(圖5,圖6),HYP含量降低(圖7)。綜上所述,miR-138-5p通過抑制HIF-1α信號通路下調(diào)與纖維化相關(guān)的TGF-β1、collagn l、HYP、IL-1β、TNF-α和α-SMA的表達(dá)。


(圖4 雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證miR-138-5p靶向HIF-1α)


(圖5 qPCR分析不同處理2周和4周脈絡(luò)膜組織中HIF-1α,TGF-β1,collagn l,α-SMA和miR-138-5p水平)


(圖6  Western blot檢測miR-138-5p治療2周和4周后,LIM豚鼠脈絡(luò)膜組織中HIF-1α,TGF-β1,collagn I和α-SMA水平)


(圖7 miR-138-5p載體在各組脈絡(luò)膜中HYP的表達(dá))


綜上所述,該研究證實(shí)了透鏡誘導(dǎo)的近視豚鼠脈絡(luò)膜厚度降低并呈纖維化趨勢,與眼軸長度的延長呈正相關(guān)。miR-138-5p可通過抑制HIF-1α信號通路,有效降低TGF-β1、α-SMA、HYP、IL-1β、TNF-α、collagn l的表達(dá),減輕近視眼豚鼠脈絡(luò)膜纖維化過程。研究結(jié)果表明hif -1α介導(dǎo)的脈絡(luò)膜纖維化可能是預(yù)防近視的一個(gè)新的潛在靶點(diǎn),為在臨床實(shí)踐中使用microRNAs控制近視發(fā)展提供了新的見解。


吉滿助力


產(chǎn)品名稱:miR-138-5p過表達(dá)慢病毒和對照慢病毒(genomeditech)

所選載體:PGMLV-6395:PGMLV-CMV-MCS-EF1-ZsGreen1-T2A-Puro

注射體積:5μl

病毒滴度:1×108TU/mL


如想了解更多質(zhì)粒構(gòu)建,病毒包裝,穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建,敲除細(xì)胞株,報(bào)告基因檢測等相關(guān)服務(wù)。歡迎訪問吉滿生物官網(wǎng):zxpdf.cn

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