報告基因檢測是現(xiàn)代分子生物學(xué)研究領(lǐng)域中分析結(jié)構(gòu)基因旁側(cè)區(qū)域潛在的順式元件(如啟動子、增強子和沉默子等)和反式作用因子相互作用關(guān)系的一種重要工具。吉滿生物生產(chǎn)的雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒(Dual Luciferase Reporter Gene Aassy Kit)，是一種結(jié)合螢火蟲和海腎熒光素酶檢測的先進(jìn)輔助報告基因技術(shù)。
雖然螢火蟲和海腎熒光素酶都具有生物發(fā)光報告基因的檢測特點，但它們卻具有完全不同的進(jìn)化起源，因而它們的酶結(jié)構(gòu)和底物要求完全不同。我們利用這一特點，將它們配合起來使用，即可形成十分有效的雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)，其中Renilla Luciferase通常作為內(nèi)對照。
它的實驗原理是先以螢火蟲熒光素(firefly luciferin，以下簡稱熒光素)為底物來檢測細(xì)胞中的螢火蟲熒光素酶（firefly luciferase，以下簡稱熒光素酶）。熒光素酶在ATP,Mg2+和O2參與下催化熒光素，生成氧化熒光素（oxyluciferin）,熒光素在被氧化過程中，產(chǎn)生生物發(fā)光(Bioluminescence)。然后在后續(xù)實驗中抑制該反應(yīng)，來終止螢火蟲熒光素的生物發(fā)光，同時加入海腎熒光素酶(Renilla Luciferase)的底物腔腸素（coelenterazine）。在O2參與下，腔腸素被海腎熒光素酶催化氧化成氧化熒光素（coelenteramide）產(chǎn)生生物發(fā)光。然后通過化學(xué)發(fā)光儀或液閃測定儀測定生物發(fā)光。
雙熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)在單熒光素酶報告基因的基礎(chǔ)上引入了“內(nèi)參對照”報告基因，這樣可以在最大程度上減小細(xì)胞數(shù)目、細(xì)胞生長狀態(tài)和轉(zhuǎn)染效率等外在因素對于實驗的影響，使得實驗結(jié)果更為可信。
